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blot实验所需溶液的配制 用于Western-材料测试

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1、30%丙烯酰胺贮存液:称取14.5g丙烯酰胺和0.5g N-N-甲叉双丙烯酰胺,将其溶于50ml三蒸水中,棕色瓶中避光保存。
2、SDS-PAGE电泳缓冲液:称取14.4g甘氨酸,3g Tris碱和1g SDS溶于1L三蒸水中,不用调pH。
3、分离胶缓冲液(4×) 1.5mol/L Tris-Cl pH8.8
称取18.15g Tris碱,将其溶于80ml三蒸水中,用浓盐酸调pH到8.8(约需浓盐酸4~5ml),加三蒸水至100ml。
4、浓缩胶缓冲液(4×) 0.5mol/L Tris-Cl pH6.8 称取6g Tris碱,将其溶于80ml三蒸水中,用浓盐酸调pH到6.8(约需浓盐酸3ml),加三蒸水至100ml。陈雁升
5、10%过硫酸铵:称取0.1g过硫酸铵溶于1ml水中三眼神童。现用现配(或冰箱保存不超过两周)。
6、10%SDS:称取5g SDS溶于50ml三蒸水中,室温保存。
7、考马斯亮蓝染色液:0.25%考马斯亮蓝R-250,50%甲醇,7%冰乙酸
称取1.25g考马斯亮蓝R-250机甲世纪 ,加入250ml甲醇,35ml冰乙酸杀出狂人镇,补充蒸馏水至500ml,滤纸过滤后置棕色瓶中保存,可重复使用贱人工具箱。
8、考马斯亮蓝脱色液:30%甲醇,7%冰乙酸。(或:甲醇:冰乙酸:ddH2O=3:1:6)
9、TBST(tris buffer solution with tween-20):20mmol/L Tris-Cl(pH7.5),500mmol/L NaCl,0.05%tween-20。
称取Tris碱1.21g,NaCl 14.6g,将其溶于500ml蒸馏水中,加入6~10滴浓盐酸,调pH到7.5左右,加入250μl tween-20nyc早教。
10、转移缓冲液:39mM甘氨酸,48mM Tris碱,0.037%SDS,20%甲醇
称取1.46g甘氨酸,2.9g Tris碱,0.185g SDS,将其溶于400ml三蒸水中,加入100ml甲醇。
11、封闭液:5%脱脂奶粉或1%BSA(用TBS配制)。现用现配。
12、抗体稀释液:用TBS配制(亦可用PBS)《见与不见》。现用现配。来源:实验之家,如需转载,请加小编微信:13510323202,并注明“媒体合作”。未经允许私自转载或未按照要求格式转载,测了么将保留追究其法律责任的权利。

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